Для туляремии (Francisella tularensis) как одной из природно-очаговых зоонозных инфекций характерна триада биоиеноза:

  • возбудитель;
  • резервуары возбудителя;
  • переносчики — кровососущие насекомые. Выделяют 3 подвида туляремийного микроба:
  • неарктический (американский);
  • среднеазиатский;
  • голарктический (европейско-азиатский).

Неарктический подвид бактерии, в отличие от остальных, ха­рактеризуется высокой патогенностью для человека и лабора­торных животных.

Морфология

 туляремийные бактерии имеют очень мелкие раз­меры — 0,3—0,5 мкм, способные проходить через некоторые бактериальные фильтры. При культивировании на искусствен­ных питательных средах микроб туляремии обычно имеет фор-. мы очень мелкого кокка, а в органах животных чаще встреча­ется в виде коккобактерий.

В культурах на питательных средах бактерии туляремии обна­руживают полиморфизм, особенно выраженный у американ­ской разновидности. Микроб неподвижен, спор не образует, имеет небольшую капсулу. В культурах характерно образова­ние бактериями слизи, легко обнаруживаемой при изготовлении мазков на стекле. Бактерии туляремии окрашиваются все­ми красками, обычно применяемыми в лабораторной практи­ке, но заметно бледнее, чем многие бактерии. По Граму туляремийные бактерии окрашиваются отрицательно. Мазки-отпечатки из органов окрашиваются по Романовскому-Гимзе, при этом туляремийные микробы отличаются от другой (посторонней) флоры более нежной фиолетовой окраской и более мелкими размерами.

Биология, культуральные свойства: микроб туляремии прихот­лив в отношении выращивания на искусственных питательных средах. Он не растет на обычном мясо-пептонном агаре или бульоне. Микробы удается культивировать на желтковых сре­дах при добавлении цистина и других питательных веществ, особенно крови. Температурный оптимум 36—37°С. Строгие аэробы. Изолированные колонии удобно получать при посеве на чашки со средой Емельяновой (гидролизат рыбной муки, же­латин, дрожжи, хлористый натрий, глюкоза, цистин, агар) или средой Френсиса — (мясо-пептонный агар с 1%-ным пептоном, 0,5%-ный хлористый натрий, цистин, глюкоза).

После стерилизации эти среды добавляют к 5—10 мл кроличьей дефибринированной крови. Колонии на этих средах — белова­того цвета с голубоватым оттенком, круглые, с ровным краем, выпуклые, гладкие, блестящие, при разреженном посеве они достигают (через несколько дней) 1—2 мм и более в диаметре.

В жидких питательных средах туляремийный микроб размно­жается хуже, причем рост отмечается лишь на поверхности среды, что связано с аэрофильностью бактерии. Хорошие ре­зультаты выращивания можно получить либо при добавлении к жидким средам коллоидов (куриного желтка, агара и т. д.), либо при аэрации среды. Способность сбраживать углеводы и спирты у микроба туляремии ограниченна. Туляремийные микробы ферментируют до кислоты глюкозу, мальтозу, а в ря­де случаев — левулезу и маннозу. Лактозу, сахарозу, маннит и ряд других веществ туляремийные бактерии не ферментируют.

Устойчивость к физическим и химическим факторам

 во внеш­ней среде возбудитель сохраняется длительное время, особенно при низких температурах: в зерне и соломе при температуре ниже 0 °С до 6 мес, в замерших трупах животных — до 8 мес. В естественных условиях обнаруживали возбудители туляремии в воде ручьев, колодцев, а также в соломе и других объектах, это имеет важное эпидемиологическое значение. Туляремийные бактерии нестойки к высоким температурам — кипячение не­медленно убивает микробов, а нагревание до 60 °С обусловли­вает их гибель в течение 20 мин. Под действием прямых сол­нечных лучей туляремийные бактерии погибают через 20-30 мин, на рассеянном свету жизнеспособность их сохраняется до 3 дней.

Микроб туляремии нестоек к обычным дезинфицирующим веще­ствам — лизолу, фенолу, хлору, сулеме. Особенно чувстви­тельны бактерии к этиловому спирту и при его воздействии погибают менее чем за минуту.

Антигенное строение

туляремийный микроб содержит 2 анти­генных комплекса:

  • оболочечный (Vi);
  • соматический (О).

С оболочечным антигеном связаны вирулентность и иммуно-генные свойства возбудителя. При Vi-агглютинации, характер­ной для вирулентных культур, на дно пробирки в осадок выпа­дает стойкий агглютинат, при встряхивании легко разбиваю­щийся на мелкие хлопья; при О-агглютинации, свойственной полностью авирулентным культурам, в осадок выпадает не­стойкий агглютинат, при встряхивании легко разбивающийся на мелкие хлопья или почти гомогенную взвесь. Туляремийные бактерии обнаруживают антигенную близость с бруцеллами: специфическая туляремийная агглютинирующаяся сыворотка высокого титра может в небольших разведениях агг­лютинировать бруцелл, а бруцеллезная сыворотка — туляре­мийные бактерии. Некоторые сапрофитные бактерии также обладают способностью частично агглютинироваться туляре-мийной сывороткой. У музейных штаммов туляремийных бак­терий может наблюдаться бактериофагия, но этот феномен можно обнаружить лишь при посеве на чашки со специально подобранными средами.

 Патогенность.

Штаммы туляремийных бактерий, выделяемые в природных очагах от грызунов, клещей и других объектов, а также от больных людей, обладают в высокой степени сходны­ми признаками, включая вирулентность. Различия обнаружива­ются лишь между штаммами — американским и европейскоазиатским. При культивировании на искусственных питатель­ных средах происходит превращения туляремийных бактерий из вирулентной S-формы в авирулентную R-форму, их обозна­чают как SR-вариант. Они обладают остаточной вирулентно­стью для чувствительных к туляремии животных, например белых мышей.

Болезнетворные свойства туляремийного микроба

 в основном связаны с токсическими веществами, представляющими собой эндотоксин. Микроб туляремии патогенен для многих видов млекопитающих, и особенно грызунов, но степень его пато-генности не для всех видов одинакова.

Наибольшую восприимчивость и чувствительность к туляре­мии проявляют полевки, водяные крысы, зайцы, хомяки, до­мовые мыши и другие грызуны и насекомые. У этих животных даже при минимальных дозах заражения заболевание протекает по типу острой септицемии, они выделяют возбудителя в большом количестве с мочой и калом и погибают с необычай­но интенсивным обсеменением бактериями внутренних орга­нов и крови.

Источник: alexmed.info

Возбудитель туляремии

Таксономия

Отдел: Gracilicutes

Семейство: Francisellaceae

Род: Francisella

Вид: Francisella tularensis

История открытия

В 1910 г. сотрудники Калифорнийской противочумной станции обратили внимание на чумоподобные бубоны у местных сусликов, обитающих вблизи озера Туляре.

Лишь в 1912 году удалось обнаружить микроорганизм, названный Bacterium tularensis.

В 1925 году в Японии выделен тот же микроорганизм.

Их идентичность доказана Френсисом, он же установил, что болезнь передается от грызунов к человеку. Род микроорганизмов назван в честь него.

Исторические факты

Осторожно! Оружие массового поражения!

Первый опыт применения биологического оружия в военных действиях относится к II тысячелетию до нашей эры и принадлежит Хеттам- они отправляли зараженных туляремией овец, что вызывало мор в стане врага.

В 1942 году при битве под Сталинградом данное ОМП использовалось немцами против русских

Есть данные о использовании его в1999 в Косово.

Первое в истории бактериологическое оружие.

Морфология и тинкториальные свойства

Очень мелкие (0,3-0,5 мкм) полиморфные палочки

Грам «-»

Спор не образует

Неподвижны

Образуют капсулу

Доминируют кокковидные формы

Слабо воспринимают анилиновые красители и окрашиваются бледнее, чем другие грамотрицательные бактерии

Культуральные свойства

Хемоорганогетеротроф факультативный анаэроб Оптимум роста 37-38 °С, рН 6,8-7,4

На искусственных средах переходят из S в R – форму (в авирулентную и неиммуногенную) Вакцинные штаммы бактерий представляют собой промежуточную форму изменчивости, которую обозначают как SR-вариант.

Оптимальные среды:

содержащие витамины

яичный желток (среда Мак-Коя или Чепина)

кровь(среда Френсиса)

экстракты органов и тканей животных, для роста необходим цистеин.

Являются внутриклеточными паразитами!

Культуральные свойства

Не растёт на простых питательных средах!

На плотных средах — мелкие колонии молочно-белого цвета.

В жидких средах размножаются только у поверхности среды

Хорошо культивируется в желточном мешке куриного эмбриона

Биохимическая активность – очень низкая

Сахаролитическая активность

До кислоты:

Глюкоза +

Мальтоза +

Манит +/-

Протеолитическая активность

Н2S +

Индол –

Иная активность

Глицерин + Отличает наиболее патогенный вид

Антигенная структура:

О-аг Определяет экзотоксические свойства

Vi-аг Определяет вирулентность и вызывает аллергическую реакцию (поверхностный)

Обладает антигенным сродством с бруцеллами и возбудителем чумы.

Факторы патогенности

Эндотоксин

Вызывает общую интоксикацию.Высвобождаются при лизисе бактериальной клетки.Вызывает стойкое повышение температуру тела.Общее недомогание

Vi-аг

Определяет вирулентность и вызывает аллергическую реакцию (поверхностный)

Капсула

Защищает от фагоцитоза

Патогенез

Возбудитель туляремии микробиологияВозбудитель туляремии микробиологияВозбудитель туляремии микробиологияВозбудитель туляремии микробиологияВозбудитель туляремии микробиологияВозбудитель туляремии микробиологияПроникновение Лимфоузлы(лимфаденит) Фагоцитоз Выделение эндотоксина (подъем температуры тела) Общая интоксикация Бактериемия Генерализация процесса

Формы

Кожно-бубонная

Генерализованная

Глазобубонная

Легочная

Ангинозно-бубонная

Резистентность

Длительно сохраняется при низких температурах (0-4оС до 6 месяцев)

Хорошо сохраняется в воде, выдерживает высушивание

Плохо устойчивы к высоким температурам (при кипячении 1-2 мин) и солнечному свету

При обработке дезинфектантами сохранятся 3-5 мин.

Чувствительны к некоторым антибиотикам (стрептомицин, гентамицин)

Эпидемиология и пути передачи Источник: мелкие грызуны,Зайцы,Кровососущие,Реже другие животные (82 вида) ,Больной и выздоравливающий человек

Пути: трансмиссивный (клещи, слепни, комары),контактный,алиментарный,аэрозольный

ID: 10 клеток

LD: 0,001Мг*мин/л

Диагностика

Материал для исследования : Гной из бубонов, пунктат лимфатических узлов, соскоб из язвы, отделяемое конъюнктивы, налет из зева мокрота, кровь, паталого-анатомический материал.

  • Бактериоскопический метод

  • Бактериологический метод

  • Серологический метод

  • Аллергопробы

  • Биологический метод

  • Экспресс-методы диагностики

Важно!

1.Первоначально необходимо определить форму болезни.

2.Для диагностики используются все методы.

Иммунитет

Стойкий Пожизненный Развивается аллергизация организма к антигенам

Лечение и профилактика

Лечение проводят:

1.Антибиотикотерапия: Стрептомициновый ряд, тетрациклиновый ряд

2. При затяжных формах АБ терапию сочетают с вакцинотерапией.

Профилактику проводят в 3 стадии:

1-я стадия: устранение источника

2-я стадия: разрыв механизма и путей передачи

3-я стадия: специфическая профилактика – туляремическая вакцина по эпидемиологическим показаниям.

Источник: StudFiles.net

Франциселла туляремии

Названы в честь Е. Франциса. Второе название дано по наименованию района Туляре в США, где в 1912 г. был выделен возбудитель туляремии — Francisella tularensis. К данному роду относится большое количество бактерий, патогенность которых для человека не установлена.

Морфология и физиология

F. tularensis представляют собой мелкие грамотрицательные коккобактерии, не образующие ни спор, ни жгутиков. Окружены мало выраженной капсулой. Аэробы, требовательные к питательному субстрату. Культивируют на питательных средах, содержащих цистеин, яичный желток, либо на кровяном агаре с цистеином и глюкозой. Бактерии туляремии образуют небольшие колонии беловатого цвета. На жидких средах растут на поверхности среды. Ферментируют глюкозу, мальтозу и другие сахара с образованием кислоты. Некоторые штаммы ферментируют глицерин, что используется для дифференциации этих бактерий.

Антигены

Содержат Vi-антигены и О-антигены, связанные с клеточной стенкой.

Патогенность и патогенез

Факторы вирулентности у франциселл туляремии примерно такие же, как и у ряда других грамотрицательных бактерий, в частности бруцелл. Адгезия происходит на эпителиальных клетках респираторного и кишечного трактов за счет капсулы и белков наружной мембраны клеточной стенки. Они обладают высокой инвазивностью, о чем свидетельствует их способность проникать в организм через неповрежденную кожу и слизистые оболочки глаз, носоглотки, гортани, пищеварительного тракта. Далее они проникают в лимфоциты региональных лимфоузлов, где размножаются и попадают в кровяное русло, вызывая состояние бактериемии. Токсичность этих бактерий связана с освобождением эндотоксина (ЛПС) при их разрушении.

Иммунитет

При туляремии наблюдается клеточный и гуморальный иммунный ответ. Первый приводит к развитию ГЗТ, которая появляется в начале заболевания и сохраняется в течение многих лет. Антитела обусловливают напряженный гуморальный иммунитет.

Экология и эпидемиология

Туляремия — природно-очаговая зоонозная инфекция. Естественные хозяева возбудителя туляремии — грызуны (водяные крысы (ондатры), полевки, домовые мыши и др.). Туляремия зарегистрирована у многих видов диких животных. Заражение людей происходит при прямом контакте с больными животными и их трупами, а также через объекты внешней среды (вода, пищевые продукты и др.),инфицированные грызунами. В воде и зараженных продуктах возбудитель сохраняет свою жизнеспособность в течение длительного срока. Возможно заражение трансмиссивным путем при укусах кровососущими членистоногими (комары, клещи, слепни).

Туляремия

Туляремия — острая инфекционная болезнь с природной вогнищевиегю, характеризуется лихорадкой, поражением лимфатических узлов, кожи, миндалин, легких, глаз и других органов. Возбудитель заболевания Francisella tularensis. Туляремийные бактерии в S-форме имеют два антигена — О и Vi (капсульный). О-антиген обнаруживает родство к антигенам бруцелл. Различают три подвида возбудителя туляремии: голарктические (для стран северного региона), Неарктического (американский) и среднеазиатский. Резервуаром и источником инфекции являются различные виды диких и домашних грызунов (ондатры, водяные крысы, зайцы, мыши, хомяки и др.)., А также домашние животные (свиньи, овцы, коровы). Человек зачтется только от животных, от человека к человеку возбудитель не передается.Заражение происходит контактно-бытовым путем (при контакте с больными животными и их выделениями) алиметарним (при употреблении инфицированных продуктов питания и воды) воздушно-пылевым (во время обмолота зерновых, обработки фуража и т.п.); трансмиссивным (через укусы кровососущих насекомых). Для человека минимальная инфицирующая доза — одна микробная клетка.При проведении диагностики туляремии используют бактериологический, биологический, серологический и аллергический методы. Предпочтение отдается серологическим реакциям и аллергическим пробам, которые можно провести в любых клинических и микробиологических лабораториях. Заражение лабораторных животных и выделение чистых культур возможно только в лабораториях диагностики особо опасных инфекций.В зависимости от клинической формы туляремии, у больных берут такие материалы для исследования: слизь из ротоглотки, пунктат бубона, мокрота, кровь, гной из конъюнктивы, содержимое пустул и язв. Исследуют также органы погибших грызунов, воду, воздух, кровососущих насекомых, пищевые продукты, контаминированных выделениями животных и грызунов. Взятие материала и его доставка в лабораторию осуществляется при строгом соблюдении правил работы с возбудителями особо опасных инфекций.

Биологическое и бактериологическое исследование

Бактериологический метод диагностики туляремии имеет важную особенность — выделить возбудитель в первых генерациях непосредственно от больного почти никогда не удается. Поэтому исследуемым материалом сначала заражают гвинейских свинок (лучше) или белых мышей, а потом от них выделяют и идентифицируют чистую культуру. Этот метод является самым чувствительным для выявления туляремийных бактерий в любом материале. DLM для этих животных — одна микробная клетка.Заражают два гвинейские свинки или 3-5 белых мышей. Животные погибают на 5-14 сутки. Если они остаются живыми, их забивают, вскрывают, кровь, костный мозг, эмульгированные лимфатические узлы и паренхиматозные органы сеют на свернутое желтковая среду Мак-Коя и Чепино или глюкозо-цистиновыми кровяной агар Френсиса. При необходимости к сред добавляют 100 ЕД пенициллина для подавления роста посторонней микрофлоры. Предложено также жидкое элективные среды с аминокислотами, витаминами, микроэлементами. На простых средах возбудитель туляремии не растет. Туляремийные бактерии можно выделить путем заражения в желточный мешок куриных эмбрионов, где их легко обнаружить с помощью метода иммунного флуоресценции. Посевы выращивают в термостате в течение 3-5 дней при температуре 37 ° С. Параллельно с посевами из тех же материалов погибших животных готовят мазки-отпечатки и окрашивают их по методу Романовского-Гимза. Возбудители туляремии имеют вид маленьких (0,2-0,7 мкм) коккообразные или палочковидных бактерий. В мазках из органов они имеют нежную капсулу.На среде Мак-Коя и Чепино туляремийные бактерии растут в виде нежных маленьких колоний, напоминающие капельки росы. На агаре Фрэнсиса колонии круглые с гладкой поверхностью, молочного цвета, слизистые, окружены зеленым ореолом. Жидкая среда мутнеет, на дне образуется слизистый осадок.Типичные колонии исследуют микроскопически, пересевают в полужидкую элективные среды в пробирке; культуры, выросшие идентифицируют по морфологическим (очень мелкие грамотрицательные кокобактерии), культуральным признакам (не растут на простых средах), биохимическими (раскладывают глюкозу, мальтозу, левулезы, выделяют сероводород , не образуют индола) и в реакции агглютинации со специфическим агглютинирующие сывороткой. Последняя реакция и позитивная биопроба являются решающими при определении возбудителя туляремии.Для выделения туляремийных микробов из воды 1 л ее предварительно фильтруют через мембранные фильтры или центрифугируют. Ресуспензованим осадком из мембраны или со дна центрифужные пробирки заражают белых мышей. Смывы с различных объектов и пищевые продукты исследуют на наличие возбудителей туляремии также методом биопробы.

Серологическая диагностика

В обычных клинических условиях для диагностики туляремии проводят только серологические реакции и аллергическую пробу с тулярином. Начиная с 10-12 дня болезни ставят объемную реакцию агглютинации, которая по методике не отличается от реакции Райта. У больного берут 2-3 мл крови из локтевой вены или пальца, получают сыворотку, которая должна быть абсолютно прозрачной. Реакцию ставят с разведенными сыворотки от 1:50 до 1:800, сопровождая ее соответствующими контролями.Антигеном в реакции агглютинации служит туляремийный диагностикум, в 1 мл которого содержится 10 млрд. микробных тел. Перед употреблением его разводят в 10 раз.Пробирки встряхивают и ставят в термостат на 2 ч, затем выдерживают 18-20 ч при комнатной температуре и анализируют результаты. Диагностическое значение имеет титр 1:100. Такая концентрация антител наступает в конце 2-й недели, после чего титр аглютинив нарастает в 4-8 раз, в то время как у переболевших ранее он остается практически неизменным.

Кровяно-капельная реакция

Кровяно-капельную реакцию агглютинации употребляют как ускоренный ориентировочный метод диагностики туляремии, особенно при массовых обследованиях. На тщательно обезжиренное стекло берут толстую каплю крови из пальца больного. К ней добавляют такой же объем дистиллированной воды, чтобы вызвать гемолиз. Рядом наносят каплю туляремийного диагностикума (5 млрд микробных тел в 1 мл). Обе капли смешивают стеклянной палочкой. При наличии у больных титра антител 1:100 и выше агглютинация на стекле наступает немедленно, при более низких титрах — через 2-3 мин. У всех больных с положительным кровяно-капельной пробой ставят объемную реакцию агглютинации.Очень чувствительным методом серологической диагностики туляремии является реакция непрямой гемагглютинации. Она эффективна как при ранней, так и при ретроспективной диагностике, а также для определения уровня антител после вакцинации. Антигеном для РНГА служит туляремийный эритроцитарный диагностикум (консервированные формалином бараньи эритроциты, сенсибилизированные туляремийным антигеном). Методика постановки РНГА при туляремии такая же, как и при бруцеллезе. Гемаглютинацийни титры сывороток у больных достигают 1:1280-1:2560 и выше.Высокочувствительная и специфическая непрямая реакция иммунофлюоресценции. Диагностикум для РТФ является взвесь вакцинного штамма туляремийных бактерий в концентрации 500 млн / мл. Сыворотку разводят от 1:5 до 1:640. Диагностическим титром считают разведение 1:40 и более, которое дает яркое свечение поверхности микробных клеток. Положительная РИФ бывает также у переболевших ранее и вакцинированных.Для ранней диагностики туляремии используют также РСК на холоде. Кровь у больного берут в конце 1-й недели заболевания, антигеном служит диагностикум.В природных очагах туляремии для контроля за развитием эпизоотии среди грызунов используют РНГА и ИФА с целью виялення антигенов в тушках грызунов и птиц.

Аллергические пробы

Аллергические пробы отнесены к ранним и высокоспецифичных методов диагностики туляремии. Они становятся положительными уже с 3-5-го дня болезни. Для постановки проб используют 2 препарата тулярином. Первый содержит 500 млн. бактерий в 1 мл, второй — 10 млрд. Согласно используют внутрикожный метод введения тулярином с меньшей концентрацией микробных тел и накожный — для более концентрированного препарата.Для постановки внутрикожной пробы 0,1 мл тулярином вводят в кожу предплечья. При постановке кожной пробы на наружную поверхность плеча наносят каплю тулярином и через нее делают 2 параллельных насечки длиной 8-10 мм, плоским боком пера втирают препарат в насечки. Реакцию учитывают через 24 и 48 час. За положительную пробу считают развитие инфильтрата диаметром 5 мм и более. Положительная проба на протяжении нескольких лет остается у переболевших и вакцинированных лиц.

Профилактика и лечение

Специфическая профилактика туляремии проводилась живой вакциной Гайского-Эльберта, получение которой явилось в свое время большим достижением советских ученых. Для лечения применяют антибиотики широкого спектра действия.

Источник: vse-zabolevaniya.ru

Возбудитель туляремии микробиология

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Этот сайт использует Akismet для борьбы со спамом. Узнайте как обрабатываются ваши данные комментариев.